更新时间:2024-11-19
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实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
产品名称 | 浮萍PCR鉴定试剂盒* |
英文名称 | spirodelae |
货号 | BH-P99466 |
产品及特点:
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒。
具有高灵敏度、高特异性、高稳定性
可在同一个管子中高特异性的执行cDNA合成与基于探针的qPCR反应。更多优点如1.的特异性;2.多重反应(高通量);3.反应体系配置,无需冰块;4.无惧高GC含量PCR;5.预防交叉污染;6.广泛的设备兼容性。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
786-O [786-0], 人肾透明腺癌细胞酮咯酸Ketorolac质量规格:>98%
人B细胞瘤细胞;RAMOS(RA.1) 大鼠胰腺星状细胞*培养基 100mLLeflumide质量规格:>98.5%,USP31,BR
视网膜微血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)(标准品)Leflumide质量规格:HPLC>98%,标准品
AXR2 Others Mouse 小鼠 AXR2 / CMG2 人细胞裂解液 (阳性对照) 左Levofloxacin Hemihidrated质量规格:>98.5%,USP34,BR,可用于细胞培养
大鼠脑胶质瘤细胞;C6左(标准品)Levofloxacin Hemihidrated质量规格:HPLC>98%,标准品
OK(负鼠肾小管细胞) 5×106cells/瓶×2Clopidogrel质量规格:美国进口
Promocell C-27001 Osteoblast Growth Medium, 成骨细胞生长培养基(即用型) 500ml标记d4Clopidogrel Labeled d4质量规格:美国进口
甲状腺滤泡上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)4-羟基卡唑4-Hydroxycarbazole质量规格:>98%
FCGR2B Others Cymolgus 食蟹猴 CD32b / FCGR2B 人细胞裂解液 (阳性对照) 雌激素酮硫酸盐,去氢表雄酮硫酸钠Dehydroepiandrosterone-3-sulfate质量规格:>98%
3T3 小鼠成纤维细胞缬盐酸盐 Valganciclovir 质量规格:>99%,USP
PLAT Others Human 人 tPAβ 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-硝基愈创木酚(植物激素级)质量规格:>98%,植物激素级5-Nitroguaiacol
CL-0207SHG-44 (人胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×26-溴-2-萘酚(>98%,BR)质量规格:>98%,BR6-Bromo-2-naphthol
PROCR Others Human 人 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-(γ,γ-二甲基1丙基氨基)嘌呤核苷(植物激素级)质量规格:>98%,植物激素级6-Dimethylallylami purine riboside
小鼠食管上皮细胞*培养基 100mL6-甲基(>98%,BR)质量规格:>98%,BR6-Methylcoumarin
BNL CL.2小鼠胚胎肝细胞 BNL CL.2 mouse embryo liver cells DMEM培养基+10%FBS5-甲基-1,10-菲咯啉水合物(>98.0%(T))质量规格:>98.0%(T)5-Methyl-1,10-phenanthroline Hydrate
浮萍PCR鉴定试剂盒*人肾皮质上皮细胞裂解物HRCEpiCL马铃薯浸出芬,英文名或英文缩写:Potato extract,级别:超,98%,规格:25U
IFNGR2 Others Mouse 小鼠 IFNGR2 人细胞裂解液 (阳性对照) 倍录米 ≥99% BqCLOMqTHcSONq 4419-39-0
BHK-21 [C-13] 仓鼠肾成纤维细胞2-录-4-硝基本-α-L-岩藻糖苷,英文名或英文缩写:CNP-Afu,级别:标准溶液,100ug/ml,规格:100克
CL-0142LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷细胞)5×10