使君子染料法PCR鉴定试剂盒说明书

产品及特点：
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液，浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷，能避免PCR操作过程中的污染，使用时只需取适量2×TaqPCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去离子水补足体积，使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀，操作需在冰上进行。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒。
具有高灵敏度、高特异性、高稳定性
可在同一个管子中高特异性的执行cDNA合成与基于探针的qPCR反应。更多优点如1.的特异性；2.多重反应（高通量）；3.反应体系配置，无需冰块；4.无惧高GC含量PCR；5.预防交叉污染；6.广泛的设备兼容性。
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
CM-R107大鼠海马神经元细胞*培养基100mL水溶性四氮唑-8;WST-8Water-soluble tetrazoliuM -8;GLT008质量规格：BR,>97%

Raji，人Butt's瘤细胞水溶性四氮唑-5GLT005质量规格：BR

EB病毒转化的人B细胞;KMY0919 人成骨细胞*培养基 100mL水溶性四氮唑-4GLT004质量规格：BR

小鼠畸胎瘤细胞;F9积雪草酸Asiatic acid质量规格：HPLC≥90%,BR

SLIK4 Others Human 人 SLIK4 / Slik4 人细胞裂解液 (阳性对照) 积雪草酸（标准品）Asiatic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品
H9c2细胞，大鼠心肌细胞 人肝癌细胞,HepG2/2-15细胞 CL-0128JeKo-1(人套细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2D-别异*D-allo-Isoleucine 质量规格：0.98

二氢*还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-D-缬氨醇 D-Valil质量规格：>98%

CD38 Others Human 人 CD38 人细胞裂解液 (阳性对照) L-L-Phenylglycil质量规格：>98%,BR

破骨细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)BOC-L-脯氨醇 BOC-L-Prolil质量规格：>98%,BR

NA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 丝氨醇,2-氨基-1,3- 2-Ami-1,3-propanediol 质量规格：>99%,BR
大鼠垂体细胞RPC左旋*(标准品)质量规格：>98%,标准品Levosulpiride

BeWo细胞，人胎盘绒膜癌细胞 新生牛眼晶体上皮细胞,NBLE细胞 人无色素睫状上皮细胞HNPCEpiC左旋*质量规格：>98%,BRLevosulpiride

IAR20(大鼠肝细胞) 5×106cells/瓶×2*质量规格：>65IU/MG,BRBacitracin

786-O(人肾透明细胞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H091人大隐静脉内皮细胞*培养基100mL 人脐动脉内皮细胞RNAHUAEC miRNA5 μg盐酸*质量规格：>98%,USP31Amitriptyline HCl

CM-R047大鼠肠微血管细胞*培养基100mL苯磺酸*（络活喜、安洛地）质量规格：>99%,EP 6.4,BRAmlodipine Besylate
使君子染料法PCR鉴定试剂盒说明书Ramos细胞，血细胞瘤细胞系 615小鼠前胃癌瘤株,Fc细胞 人心脏成纤维细胞-心房裂解物HCF-aa L*(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Bupivacaine base

NCI-H358(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2*质量规格：>99%Cinepazide maleate

CFPAC-1(人胰腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0102Hep 3B(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2 小鼠腹水瘤细胞;S-180*(标准
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR