更新时间:2024-12-02
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实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
产品名称 | 山茱萸PCR鉴定试剂盒说明书 |
英文名称 | corni |
货号 | BH-P99265 |
产品及特点:
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒。
具有高灵敏度、高特异性、高稳定性
可在同一个管子中高特异性的执行cDNA合成与基于探针的qPCR反应。更多优点如1.的特异性;2.多重反应(高通量);3.反应体系配置,无需冰块;4.无惧高GC含量PCR;5.预防交叉污染;6.广泛的设备兼容性。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
PAH Others Human 人 PAH / PH (415 Asn/Asp) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 十二烷基硫酸锂Lithium Dodecyl Sulfate质量规格:>98%,分子生物学级
CM-R094大鼠胎儿表皮角质形成层细胞*培养基100mL硫代甜菜碱 8Sulfobetaine 8质量规格:>98%,sigma分装
HEC-1A, 人内膜癌细胞系 肝细胞,BRL细胞 TE 115.T(人软组织纤维瘤细胞)硫代甜菜碱 10Sulfobetaine 10质量规格:>98%,BR
小鼠细胞白血病;L1210硫代甜菜碱 12Sulfobetaine 12,SDDAB质量规格:>98%,BR
EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人细胞裂解液 (阳性对照) 恩他卡朋;COMT抑制剂Entacapone质量规格:>99%,BR
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 锌试剂Zincon质量规格:螯合剂
F344大鼠骨髓间质干细胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cellsN-甲基-N-*硅基乙酰胺(>92.0%(GC))N-Methyl-N-TMS-acetamide质量规格:>92.0%(GC)
U373细胞,人脑胶质瘤细胞系 福氏志贺氏菌(Shigella flexneri) 人无色素睫状上皮细胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μgN-*基硅基咪唑(>98.0%(T))N-Trimethylsilylimidazole质量规格:>98.0%(T)
SK-N-BE(2) (人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2N-*基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))N-Trimethylsilylacetamide质量规格:>98.0%(GC)
HEC-1-B(人内膜腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2 散鳞镜鲤尾鳍细胞;YZ211,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))1,1,3,3-Tetramethyldisilazane质量规格:>97.0%(GC)
人癌细胞;MCF7水晶兰苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Motropein
大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6 巨核细胞白血病细胞,Dami细胞 NR8383细胞,大鼠肺泡巨噬细胞水仙苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Narcissoside
HEC-1A, 人内膜癌细胞系 HumaSU03012质量规格:>98%,有效的重组PDK-1抑制剂OSU-03012(AR-12)
CDH5 Others Human 人 CDH5 / Cadherin-5 / CD144 人细胞裂解液 (阳性对照) 斯皮诺素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Spisin
支气管上皮细胞培养基BEpiCM-prf舒马曲坦-d6质量规格:美国进口Sumatriptan-d6
山茱萸PCR鉴定试剂盒说明书RSC, 大鼠雪旺细胞偶氮脒类引发剂V65100毫克保存:-20℃
转化细胞 人卵巢成纤维细胞*培养基 100mL2,3-务二同 97% 2,3-Pqntcnqdionq 600-14-6
人脉络丛成纤维细胞RNAHCPF miRNA5 μg碳酸10克
KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 小鼠血清(无菌)100克RT
犬肾细胞;MDCK(NBL-2)2-脱氧鸟苷-5-三1酸钠盐(+4℃)NA