更新时间:2024-12-02
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实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR
产品名称 | PCR鉴定试剂盒说明书 |
英文名称 | Natrii sulfas |
货号 | BH-P99505 |
产品及特点:
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。本产品就是为此目的根据 PCR 原理开发的试剂盒。
具有高灵敏度、高特异性、高稳定性
可在同一个管子中高特异性的执行cDNA合成与基于探针的qPCR反应。更多优点如1.的特异性;2.多重反应(高通量);3.反应体系配置,无需冰块;4.无惧高GC含量PCR;5.预防交叉污染;6.广泛的设备兼容性。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
EPDR1 Others Human 人 EPDR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 曲洛司坦(标准品)Trilostane质量规格:HPLC>98%,标准品
小鼠树突状细胞肉瘤低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);DG6-GFP醋酸Triptorelin Acetate质量规格:度大于98%
HPAEpiC细胞,人肺泡上皮细胞 小鼠肾小球系膜细胞,MES-13细胞 CL-0090Hacat(人永生化角质形成细胞)5×106cells/瓶×2盐酸Vancomycin HCl质量规格:≥900μg/mg,USP33,BR
T-24(人膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸(标准品)Vancomycin HCl质量规格:含量测定
HPMEC-c 人肺微血管内皮细胞(HPMEC) 500,000cells 脑动脉血管平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)凡德他尼Vandetanib 质量规格:>99%,可用于细胞培养
MSR1 Others Rat 大鼠 MSR1 / SCARA1 人细胞裂解液 (阳性对照) 山楂酸,马斯里酸Maslinic acid质量规格:HPLC≥98%,标准品
人肺大动脉内皮细胞*培养基 100mL2-并咪唑-5-磺酸,紫外线吸收剂 UV-T2-Phenylbenzimidazole-5-sulfonic acid质量规格:>98%
SK37细胞,人色素瘤细胞 出血性大肠埃希氏菌 人上皮细胞;Ca Ski3,4-二甲氧基肉桂酸(标准品)3,4-Dimethoxycinnamic acid质量规格:>98%,标准品
ANGPTL7 Protein Cymolgus 重组食蟹猴 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (His 标签)钠Cefodizime 质量规格:>90%,BR
K-562(人慢性骨髓性白血病细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 COLEC10 人细胞裂解液 (阳性对照) Cefdinir质量规格:>92%,BR
NHEM.f Pellet 正常人表皮素细胞团块(少年者) > 1 mio.cells 人肠平滑肌细胞裂解物HISMCL3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸环已胺盐(>98%(HPLC),BR)质量规格:>98%(HPLC),BRIndoxyl-Glucuronide
CL-0186PIEC(猪髋动脉内皮细胞 )5×106cells/瓶×2代苯(>98%,医药级)质量规格:>98%,医药级Iodobenzene
FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST ( FS288 ) CHO细胞裂解液 (阳性对照) 硫化铁 (II)(>70%,BR)质量规格:>70%,BRIron (II) sulfide
人脐静脉内皮细胞裂解物HUVECL四氧化三铁(>98%,BR)质量规格:>98%,BRIron (II,III ) oxide
小耳猪肾细胞;SEPfk 癌细胞,MDA-MB-468细胞 WK256细胞,大鼠肉瘤细胞3-苯氧苄醇(98%)质量规格:0.983-Phexybenzyl alcohol
PCR鉴定试剂盒说明书人肾癌Wilms细胞;G401Aluminum铝丝50毫克AR,99%
TNFSF4 Others Cymolgus 食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 人细胞裂解液 (阳性对照) 均本四加醋 1,2,4,5-Bqnzqnqtqtrcccrboxylic ccid 1989-2-4
CL-0441SK-N-BE(2) (人神经母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2 Milrinq 78412-7-
HLF细胞,胚肺细胞 人前列腺上皮细胞,RWPE1细胞 人胚胎肌肉组织来源细胞;CCC-HSM