金银花PCR鉴定试剂盒说明书

特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据地黄保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

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使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照《食品卫生微生物学检验阪崎肠杆菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。 
二、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购上海泽叶生物科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
1、液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
2、固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
3、粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
4、其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议在样品制备区域加入阳性对照。 
实验流程：
1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
皮质甾酮(标准品)  Corticosterone  质量规格：HPLC>97.0%,标准品 RatvonWillebrandFactor,vWFELISA试剂盒大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二硫化四乙基秋兰姆  Disulfiram  质量规格：>97% 小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)ELISA试剂盒 ，英文名： Hsp-40 ELISA Kit

双硫仑(标准品)  Disulfiram  质量规格：HPLC>99%,标准品 小鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢ)ELISA检测试剂盒MouseprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 96T/48T

杨梅素/杨梅酮  Myricetin  质量规格：HPLC>95.0%,BR 人钙联蛋白(calnexin)试剂盒 Human calnexin ELISA Kit

杨梅素/杨梅酮（标准品）  Myricetin  质量规格：HPLC>98.0%,标准品 RatIerferonγ,IFN-γELISAKit大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

去氧胆酸  Deoxycholic acid  质量规格：>95.0% CASPASE-1蛋白共沉淀分析试剂盒5

β-环糊精  β-Cyclodextrin  质量规格：>98.5%,药用级 Mouselipoproteinα,Lp-αELISA试剂盒小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

  Ramipril  质量规格：>98.0,BR 小鼠热休克蛋白27(HSP-27)ELISA试剂盒 ，英文名： HSP-27 ELISA Kit

(标准品)  Ramipril  质量规格：HPLC>98,标准品 小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA检测试剂盒Mouseoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit 96T/48T

    质量规格：>99%,BR 人钙离子通道抗体(IgG)试剂盒 Human VGCC IgG ELISA Kit
Cerebroside D  中文名：脑苷脂D  分子式：C43H81NO9    猪胰岛素(INS)ELISA试剂盒           

Cerebroside B  中文名：脑苷酯B  分子式：C41H77NO9    猪乙型脑炎病毒elisa试剂盒   猪乙型脑炎病毒试剂盒   规格型号：96T/48T   猪乙型脑炎病毒试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪乙型脑炎病毒试剂盒、猪乙型脑炎病毒eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Ceftiofur   中文名：头孢噻呋盐酸盐  分子式：C19H18ClN5O7S3    猪乙酰受体抗体elisa试剂盒   猪乙酰受体抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   猪乙酰受体抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪乙酰受体抗体试剂盒、猪乙酰受体抗体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Cefquinome  中文名：头孢喹咪  分子式：C23H24N6O5S2    猪乙酰elisa试剂盒   猪乙酰试剂盒   规格型号：96T/48T   猪乙酰试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪乙酰试剂盒、猪乙酰eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Cefozopran   中文名：盐酸头孢唑兰  分子式：C19H18ClN9O5S2    猪主要组织相容性复合体Ⅲ类elisa试剂盒   猪主要组织相容性复合体Ⅲ类试剂盒   规格型号：96T/48T   猪主要组织相容性复合体Ⅲ类试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪主要组织相容性复合体Ⅲ类试剂盒、猪主要组织相容性复合体Ⅲ类eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
甾,()二烯,,三醇 HPLC≥98% 5mg PorcinePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISA试剂盒猪肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

麦珠子酸 HPLC≥98% 5mg PorcineRelaxin,RLNELISA试剂盒猪松弛肽/松弛素(RLN)ELISA试剂盒规格：96T/48T

猫尾草异黄酮 HPLC≥98% 5mg Porcine-glucosecoanspoer1,GSLT1ELISA试剂盒猪-葡萄糖共转运载体1(GSLT1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

猫眼草酚 D HPLC≥98% 5mg PorcinesolubleE-selectin,sE-selectinELISA试剂盒猪可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

毛萼晶乙 HPLC≥98% 5mg PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISA试剂盒猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

毛萼乙素 HPLC≥98% 5mg PorcinesolubleP-selectin,sP-SelectinELISA试剂盒猪可溶性P选择素(sP-Selectin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

毛果香茶菜醛 A HPLC≥98% 5mg Porcinesolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISA试剂盒猪可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

毛喉帖 G HPLC≥98% 5mg PorcinesolubleVascuolarcelladhesionmolecules1,sVCAM-1ELISA试剂盒猪可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

毛喉帖 J HPLC≥98% 5mg PorcineSomatostatin,SSELISA试剂盒猪(SS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

毛叶香茶菜丁素 HPLC≥98% 5mg PorcineSuperOxidaseDimase,SODELISA试剂盒猪超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒规格：96T/48T
金银花PCR鉴定试剂盒说明书PCB 151 标准品 9-Methylphenanthrene 52663-63-5 纯品型，5mg 特征形态 固态

PCB ,certified 标准品 2,6-Dimethylnaphthalene 51908-16-8 纯品型，5MG 特征形态 固态

PCB标准品 2,3-Dimethylnaphthalene - 纯品型，5MG 特征形态 固态