更新时间:2023-11-08
粗球孢子菌核酸检测试剂盒(荧光PCR法)公司相关产品SV40T转化脐静脉内皮细胞;PUMC-HUVEC-T1钴粉(>99%,BR)>99%,BRCobaltous powder大鼠中脑缝神经细胞(脑脊)(RNr)(1×106)铜粉(>99.5%,BR)>99.5%,BRCopper powderCM-H040结肠粘膜上皮细胞*培养基100mL三亚乙基硫代1酰胺>98%,BRTriethyle
订购信息:
产品名称:粗球孢子菌核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
规格:50T
编号:BH-P97233
分类:荧光PCR法
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
准备物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
使用及效果:
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
脐静脉平滑肌细胞RNAHUVSMC miRNA5 μg己二酸二乙酯(>99.0%(GC))Diethyl Adipate>99.0%(GC)
大鼠海马趾星形胶质细胞(RAh)(5×105)己二酸二异癸酯Diisodecyl Adipate
恒河猴肾细胞;LLC-MK2壬二酸双(2-乙基己基)酯(>75.0%(GC))Bis(2-ethylhexyl) Azelate>75.0%(GC)
KM小鼠网织细胞肉瘤瘤株;LⅡ 小鼠肾上皮细胞*培养基 100mL己二酸二异丙酯(>99.0%(GC))Diisopropyl Adipate>99.0%(GC)
MN-c, 小鼠皮质神经元 Mouse己二酸二丁酯(>99.0%(GC))Dibutyl Adipate>99.0%(GC)
CM-M037小鼠小肠隐窝上皮细胞*培养基100mL碳酸二苯酯(>99.0%(GC))>99.0%(GC)Diphenyl Carbonate
TE-10细胞,食管癌细胞 脑胶质母细胞瘤细胞,TG-905细胞 家猫皮肤细胞;FCA-S1二苄基亚砜(>98.0%(GC))>98.0%(GC)Dibenzyl Sulfoxide
Calu-1(肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2乙二醇二苯(>99.0%(GC))>99.0%(GC)Ethylene Glycol Diphenyl Ether
PTPRC Others Human CD45 细胞裂解液 (阳性对照) 十六碳酰胺(>95.0%(GC))>95.0%(GC)Hexadec*
小鼠前胃癌细胞;MFC()含量测定Pentoxifylline
粗球孢子菌核酸检测试剂盒(荧光PCR法)绒毛膜内皮细胞,英文名或英文缩写:Rapamycin,级别:BR,85%,规格:2KU
胚肾细胞;293 Cells, low passage 心室肌细胞*培养基 100mL联本酰 Bqnzil 134-81-6
肺成纤维细胞RNAHPF miRNA5 μg尿苷-5′-单嶙酸,英文名或英文缩写:U 5′-P,级别:BR,98%,规格:50毫克
IGSF8 Others Human PGRL / IGSF8 细胞裂解液 (阳性对照) 正十三烷,英文名或英文缩写:Tridecane,级别:SP,98.5%,规格:5克
小香猪皮肤细胞;SSC-S2MTT 250mg/500mg/1g Amresco分装
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。