h9 Feeder Frec人胚胎干细胞H9 (WA09)

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

1、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 培养

液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃，5%CO2细胞

培养箱中培养；

2、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终

止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序

降温盒可直接放入-80℃。

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的产品：

MDMX： MDM2样P53蛋白结合抗体 人胰腺导管癌细胞;CFPAC-1

AE-2杂交瘤细胞抗AChE AE-2 hybridoma cells against AChE DMEM+10% Hyclone 灭活血清 大鼠异柠檬酸脱氢酶(ICD)ELISA试剂盒 Anti-TG 甲状腺球蛋白抗体 RTN4R Others Mouse 小鼠 RTN4R / NOGOR 人细胞裂解液 (阳性对照)

癌组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)/1ml 大鼠乙型肝炎核心抗体(HBcAb)ELISA 试剂盒 Anti-TM 甲状腺微粒体抗体 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH3

Hela S3(人细胞) 5×106cells/瓶×2 角质细胞培养基KM-acf 大鼠乙酰肝素蛋白多糖2(HSPG2)ELISA试剂盒 AFP 甲胎蛋白定量(一/二步夹心法)　 96T

MUPP1： 紧密连接蛋白MUPP1抗体 CM-R062大鼠肾小管上皮细胞培养基100mL

H4细胞，人脑神经胶质瘤细胞(H4) 肠炎沙门氏菌 人心脏成纤维细胞-心室RNAHCF-av miRNA5 μg 人抗百日咳病毒(PT-Ab)ELISA试剂盒 BAFF/CD257(B cell activating factor) TNF家族B细胞激活因子抗原 0.5mg

hCG receptor： 促黄体生成素受体抗体 HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)

人髓母细胞瘤细胞;D341Med 人抗白蛋白抗体(AAA)ELISA 试剂盒 P53 抑制基因(抗原) 0.5mg

HER2 receptor(NT)： HER2受体抗体 人肺转化细胞;AE1201

HEC-1-A(人子宫内膜腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2 猕猴皮肤细胞;MMS7 人抗α干扰素抗体(IFNα-Ab)ELISA 试剂盒 PACAP-27/38 腺苷酸环化酶激活肽-27/38(抗原) 0.5mg

h9 Feeder Frec人胚胎干细胞H9   (WA09)FIGF Protein Mouse 重组小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 标签) 大鼠黄体生成素(LH)ELISA试剂盒 IL-13  大鼠白介素13 96T

phospho-PTPN6(Tyr536)： 0酸化蛋白酪酸0酸酶1C抗体 VEGFA Others Human 人 VEGF / VEGFA / VEGF165 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

HT1080 人成纤维肉瘤细胞 大鼠黄体生成素(LH)ELISA试剂盒 SLA(Human Proteinase 3 Antibody)  人抗肝可溶性抗原抗体 ES-2细胞，人卵巢透明细胞癌细胞 人肾上腺皮质腺癌细胞,NCI-295R细胞 肾成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠黄体激素(LH)ELISA试剂盒 ISR- Beta(Mouse Insulin Receptor Beta)  小鼠胰岛素受体β 96T

PI 3 Kinase Class 3： 0脂酰肌醇激酶3催化亚单位3抗体 CL-0088H4-IIE(大鼠肝癌细胞 )5×106cells/瓶×2

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。