HL 60（hl-60）人早幼粒白血病细胞

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

    a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。        

     c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

     b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。  

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

人脑微血管内皮细胞 大鼠信号转导分子7(Smad7)ELISA 试剂盒 sTNF AlphaR(Human soluble Tumor Necrosis Factor Alphareceptor)  人可溶性坏死因子α受体 96T

MICB： MHC I类链相关蛋白B 0.1ml

Rhesus antibody Rh EST1A 端粒酶结合蛋白EST1A抗体 小鼠T淋巴瘤细胞(鸡OVA基因修饰);E.G7-OVA

NCI-H2452(人间皮瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 L1210(白血病细胞) 大鼠信号转导分子1(Smad1)ELISA试剂盒 GnRHR  大鼠释放激素受体 96T

MLC1： 膜蛋白MLC1抗体 犬肾细胞;MDCK(NBL-2)

TE671 subline No.2细胞，人横纹肌肉瘤细胞 化脓性链球菌 转PYTL基因小鼠支持细胞;15P-1 人附睾蛋白4(HE-4)ELISA试剂盒 EPOR peptide 红细胞生成素受体抗原 0.5mg

HECT E3 ubiquitin ligase： HECT E3泛素链接酶抗体 JAG1 Others Human 人 JAG1 / JAGL1 / CD339 人细胞裂解液 (阳性对照)

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HDAC11： 组蛋白去乙酰化酶11抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM933

LS-174T(人结肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRNP / Prion 人细胞裂解液 (阳性对照) 人风疹病毒抗体(RV-Ab)ELISA试剂盒 ERK(Extracellular signal-regulated kinase) 原活化蛋白激酶抗原 0.5mg

HL 60（hl-60）人早幼粒白血病细胞CD79B Others Mouse 小鼠 CD79B / B29 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)ELISA试剂盒 CRF(Human corticotropin-releasing factor)  人促肾上腺皮质激素释放因子 96T

PKR： 蛋白激酶R抗体 CM-H053人子宫平滑肌细胞培养基100mL

Calu-1人肺癌细胞 Calu-1 human lung cancer cells McCOY's 5A+10%FBS 大鼠肺炎病毒抗体(PV-Ab)ELISA试剂盒 C-Peptide  大鼠C肽 96T

Pancreatic Lipase： 胰脂肪酶抗体 KLK13 Others Human 人 KLK13 / Kallikrein-13 人细胞裂解液 (阳性对照)

TNFa转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3-VP16-TNFa 大鼠肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)ELISA试剂盒 dDAVP(Human/1-desamino-8-D-arginine vasopressin)  人去加压素/1-去基-8-右旋-精酸加压素 96T