猪细小病毒（PPV）核酸定性检测试剂盒

订购信息：
 产品名称：猪细小病毒(PPV)核酸定性检测试剂盒
规格：50T
编号：BH-P96991
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

ENG Others Human  Endoglin / CD105 / ENG 细胞裂解液 (阳性对照) 熊果苷Arbutin≥98%，BR

兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-2氯化血根碱()Sanguinarine chlorideHPLC≥98%,

NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 细胞裂解液 (阳性对照) 亚麻木酚素（）Secoisolariciresinol DiglucosideHPLC≥98%，

(含100mL酶解缓冲液) 10mL氨基丙二酸Aminomalonic acid ≥98%,BR

PK15-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)猪肾上皮细胞 PK15-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) porcine kidney epithelial cells EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinAZD4547AZD-4547>98%,FGFR抑制剂
RSC96(大鼠雪旺细胞) 5×106cells/瓶×2醋氯芬酸（）AceclofenacUV法含量测定

Gibco 10902088 Sf-900 II SFM 1000mlTG101209TG-101209;TG 101209>98%，选择性JAK2抑制剂

角膜细胞总RNAHK NA（）Azasetron 含量测定

小鼠颗粒神经元(MGC)(1×106)（）Propranolol 溶出度检查

猫源细胞美他多辛（）MetadoxineHPLC法含量测定
猪细小病毒(PPV)核酸定性检测试剂盒张氏肝细胞;Chang liver二(2-基)二硫，英文名或英文缩写：Allyl disulfide，级别：BR，98%，规格：5克

SUME-a细胞，鼻咽癌细胞系 大鼠肝癌细胞,RH-35细胞 CM-H087冠状动脉内皮细胞*培养基100mL2-录三拂本 99% 2-Chlorobqnzotrifluoridq 88-16-4

P19(小鼠畸胎瘤细胞) 5×106cells/瓶×2十三酸，英文名或英文缩写：Tridecanoic acid，级别：BR，98%，规格：5克

Promocell C-27417 Preadipocyte Growth Medium KIT, 前脂肪细胞生长培养基套装 500ml2iPRiboside异戊1基腺嘌呤核苷20毫克超，99%

脑膜细胞Many types of cells　5 × 105方(1ml)50-81-7维生素CAscorbic Acid;VitaMin C