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如何提取病毒核酸技术
  • 发布日期:2020-01-03      浏览次数:554
    • 提取病毒核酸的试剂盒和方法技术其特征在于,包括裂解液、结合液、第yi漂洗液、第二漂洗液、洗脱液、二氧化硅磁珠、蛋白酶K和核酸助沉剂,其中,所述第yi漂洗液含有所述结合液和柠檬酸钠。

      核酸的提取纯化是进行分子生物学各项研究的基础,特别是在分子诊断领域,PCR、RT-PCR、Northernblot、RT-qPCR、cDNA文库构建、酶切等技术手段都需要纯度高、完整性好的核酸。但由于外源及内源性核酸酶的存在及其酶活性相当稳定等原因,使得提取和纯化高质量的核酸相对比较困难。核酸提取试剂配方对核酸的质量和得率有很大的影响,因此研发高效快速、回收范围广、得率高的核酸提取试剂是本领域不断探索的课题。磁珠法作为近年来兴起的新型核酸提取方法,主要原理是基于磁性纳米材料一在高盐环境下对核酸进行特异性的吸附,经过磁性分离和漂洗杂质后,在低盐溶液中被洗脱下来,从而达到对核酸进行提取纯化的目的。

      试剂盒目前市场上用于核酸提取的裂解液种类较多,常见的有经典的TRIzol、CATB-LiCl、碱裂解液等。TRIzol含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并抑制细胞内源性核酸酶,保持提取核酸的完整性;但是其用时操作繁琐、费时,提取样本中核酸的质量不佳。

       

       

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