副流感病毒4型核酸检测试剂盒

订购信息：
 产品名称：副流感病毒4型核酸检测试剂盒
规格：50T
编号：BH-P96359
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

非洲绿猴肾细胞;BS-C-1杀螟丹标准溶液(10μg/ml,u=3%)Aramite solution10μg/ml,u=3%

SKOV3 [SK-OV-3], 卵巢癌腺癌细胞系莎稗1()Anilofos分析,98.5%

B细胞瘤细胞;RAMOS 大鼠胰岛细胞*培养基 100mLAmberlite® IRA410 离子交换树脂(719(202)是高等级凝胶强碱Ⅱ型阴离子交换树脂)Amberlite® IRA-410 ion-exchange resin719(202)是高等级凝胶强碱Ⅱ型阴离子交换树脂

外周血白细胞Many types of cells(1ml)1酸二氢铵（分析,用于凯氏定氮法氮测定,≥99.5%）Ammonium phosphate monobasic分析,用于凯氏定氮法氮测定,≥99.5%

APLP1 Others Human  APLP1 / Amyloid-like protein 1 细胞裂解液 (阳性对照) 1酸二氢铵(for HPLC,≥99.0%(T))Ammonium phosphate monobasicfor HPLC,≥99.0%(T)
SFRP1 Others Human  sFRP1 / SARP2 细胞裂解液 (阳性对照) 3-羟基-4-甲氧基肉桂酸美国进口3-Hydroxy-4-methoxycinnamic Acid

CL-0047C6(大鼠胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2-d3美国进口Pyrazinamide-d3

CSAG1 Others Human  CSAGE / CSAG1 细胞裂解液 (阳性对照) 美国进口Demeclocycline

小鼠肠微血管细胞*培养基 100mL盐酸半水化合物美国进口Demeclocyclin  hemihydrate

293LVT胚肾细胞--用于慢病毒包装 293LVT human embryonic kidney cells -- for leiviral packaging DMEM(GIBCO:11995)+10% FBS(GIBCO)+1%NEAA+200mM L-glutamine乙基2-(6-氨基-2,3-二氯苄)(阿那格雷杂质A)美国进口Ethyl 2-(6-Amino-2,3-dichlorobenzyl)glycine(Anagrelide Impurity A)
副流感病毒4型核酸检测试剂盒脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C邻硝基本-α-D-葡萄糖苷shēng huà shì jì容量：100克

CMA1 Others Human  CMA1 / Chymase 1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2,4,6-三基本安 2,4,6-Trimqthylcnilinq 1988-2-1

草鱼肾细胞;GIK锌shēng huà shì jì容量：RT5克

T24细胞，膀胱移行细胞癌细胞 高分化鳞癌细胞,HCC细胞 EB病毒转化的B细胞;KMY0908碱式碳酸锌shēng huà shì jì容量：50毫升

615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM75566-99-92-2-Naphthaldehyde