猪传染性胃肠炎病毒核酸检测试剂盒

订购信息：
 产品名称：猪传染性胃肠炎病毒核酸检测试剂盒
规格：50T
编号：BH-P96634
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-71酸氢二钠七水 phosphate, dibasic, heptahydrate>98%,BR

SW-13细胞，肾上腺皮质腺癌细胞 色素瘤,Bowes Melanoma细胞 肺癌细胞;A549 [A-549]dATP溶液(100 mM)dATP 100 mM solution>97%,BR

小鼠肝癌瘤株;H22癸酸钠 decanoate>99%,进分

SPARC Others Human  SPARC / Osteonectin 细胞裂解液 (阳性对照) 琼脂糖(美仑电泳级)Agarose美仑，电泳级

髓母细胞瘤细胞;Daoy琼脂糖(Sigma)AgaroseSigma原装
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照) L-（）HPLC>98%,,还原型Glutathione (Reduced)

CL-0338G1(发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞)5×106cells/瓶×2（氧化型）度大于98%,BRGlutathione(Oxidized)

ESAM Others Mouse 小鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 细胞裂解液 (阳性对照) DL-异>99%,BRDL-Isoleucine

小鼠肺大动脉内皮细胞*培养基 100mLL--γ-苄酯0.98L-Glutamic acid γ-benzyl ester

Eca-109食管癌细胞 Human esophageal cancer cell line Eca-109. 1640+10% FBSL-苯苄酯盐酸盐0.98L-Phenylalanine benzyl ester
猪传染性胃肠炎病毒核酸检测试剂盒小脑颗粒细胞HCGC2-(2-羟苯基)苯并恶唑(>98.0%(GC)(T))>98.0%(GC)(T)2-(2-Hydroxyphenyl)benzoxazole

CD276 Others Human  CD276 / B7-H3 细胞裂解液 (阳性对照) 5,6-二溴-2,1,3-苯并噻二唑(>98.0%(GC))>98.0%(GC)5,6-Dibromo-2,1,3-benzothiadiazole

L929 小鼠成纤维细胞2-(2-羟苯基)苯并噻唑(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)2-(2-Hydroxyphenyl)benzothiazole

CM-H043肝实质细胞*培养基100mL1-氨基芘(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)1-Aminopyrene

SK-MEL-1, 皮肤色素瘤细胞2,5-二溴噻唑(>97.0%(GC))>97.0%(GC)2,5-Dibromothiazole