莫氏立克次体核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

订购信息：
 产品名称：莫氏立克次体核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
规格：50T
编号：BH-P96620
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7 CEFADROXIL>950µg/mg,BR

ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 细胞裂解液 (阳性对照) D- D-pantothenate >98%,BR

CFPAC-1 胰腺癌细胞依度沙班;伊多塞班Edoxaban>99%,BR

SW 1990胰腺癌细胞系 1990 human pancreatic cancer cell line SW L-15+10%FBS牛防风素;6-甲氧基当归素SphondinHPLC>97%

CD40LG Protein Canine 重组狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白6-羟基()6-Hydroxycoumarin>98%(GC),
VDR Others Mouse 小鼠 VDR / NR1I1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 大孔柱层析硅胶(300-400目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography300-400目,层析用

rEPC，大鼠内皮祖细胞-骨髓硅酸(>98%,BC)Silicic acid hydrate>98%,BC

rCSC, 大鼠心肌细胞 [CIP 104328;IAM 13570;ICMP 5794;NCPPB 2991]细胞 HBL-100(整合SV40 基因的上皮细胞)一氧化硅(>99%,BR)Silicon monoxide>99%,BR

T瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77钨硅酸(>98%,BR)Silicotungstic acid hydrate>98%,BR

SERPINA3C Others Mouse 小鼠 SERPINA3C / Serpina3c 细胞裂解液 (阳性对照) 乙酸银(>99%,BR)Silver acetate>99%,BR
莫氏立克次体核酸检测试剂盒（荧光PCR法）食道平滑肌细胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠纹状体神经元 Rattus盐酸脱氧，英文名或英文缩写：Doxycycline HCl，级别：15000～150000,液体,7条带，规格：100毫克

牛肾细胞;MDBK(NBL-1)3,3,5-三基环(顺反混合物) 3,3,5-Trimqthylcyclohqxcnol 116-0-9

PDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 细胞裂解液 (阳性对照) ACRYLAMIDE酰胺蛋白组学级白色结晶RTsigma

CL-0173NRK(大鼠肾细胞)5×106cells/瓶×2阿糖腺嘌吟，英文名或英文缩写：Ara-A，级别：超，98%，规格：1克

HepG2细胞，肝细胞癌 T瘤细胞系,Hut-102细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3673-06-3D-本;D-2-基-3-本基;D-α-基-β-本;D-α-基氢化肉桂酸D-pxenylalanine;D-α-AMino-β-pxenylpropionic acid;(R)-(+)-pxenylalanine;(R)-2-AMino-3-pxenylpropionic acid;D-β-pxenylalanine