新布尼亚病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

订购信息：
 产品名称：新布尼亚病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
规格：50T
编号：BH-P96537
分类：荧光PCR法
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
使用及效果：
产品特点：
◇高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
◇高灵敏度：检测灵敏度可达10~100拷贝；
◇操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
◇高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

羊膜细胞;WISH美西林/氮脒*Mecillinam>95%,BR

IL17RB Others Human  IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 细胞裂解液 (阳性对照) */安宫黄体素Medroxyprogesterone >98%,BR

CL-0343HA(羊膜细胞)5×106cells/瓶×2*()Medroxyprogesterone >98%,

P3-NS-1/1-Ag4.1细胞，骨髓瘤细胞 T细胞白血病细胞,6T-CEM细胞 EB病毒转化的B细胞;KM9402*/他巴唑/2--1-甲基咪唑Methimazole>98%,USP 32

幼蚊细胞;C6/36*()Methimazole>98%,
IL18 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL-18 / IL-1F4 蛋白 (His 标签)聚乙二醇6000分子量5,000~7,000,分子生物学级PEG 6000

NCTC 1469(小鼠正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2 WEHI 22.1(B细胞)吐温20CPTween 20

CL-0305SF-295(XG恶性胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2曲拉通X-100>98%,分子生物学级Triton X-100

PDGFRB Others Rat 大鼠 PDGFRB / PDGFR-1 细胞裂解液 (阳性对照) D-葡萄糖醛酸>98%,进分D-Glucuronic acid

脉络丛内皮细胞总RNAHCPEC NAL-别*>99%,BRL(+)-allo-Threonine
新布尼亚病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）晶状体上皮细胞 (HLEpiC)( 5×105 ) HUVEC-12, 脐静脉血管内皮细胞系 Human13-乙基-17-羟基-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(左*杂质B)美国进口13-Ethyl-17-hydroxy-18,19-dinor-17α-pregn-5(10)-en-20-yn-3-one(Levonorgestrel Impurity B)

细胞;C-33A17-去乙酰基诺孕酯美国进口17-Desacetyl Norgestimate

表皮色素细胞-深色素(HEM)( 5×105 )左西孟坦美国进口Levosimendan

rCF, 大鼠心脏成纤维细胞利奈唑酮-d3美国进口Linezolid-d3

T瘤转基因细胞;Jurkat D,E 大鼠肾小管平滑肌细胞*培养基 100mL12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrateHPLC≥98%，12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate