MCF-7人乳腺癌细胞

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

二、细胞培养操作

1) 复苏细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

    a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。        

     c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。 3) 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

     b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。  

三、培养注意事项 

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，用新鲜的培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的培养基来培养细胞。     收到细胞后次传代建议 1：2 传代 。

9. 注意：  1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。

公司正在出售的产品：

-MAP4(Ser941)： 0酸化微管相关蛋白4抗体 HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0143Lncap clone FGC(人前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒 PP  大鼠蛋酸酶 96T

membrane glycoprotein E(VZV)： 人水痘带状疱疹病毒gE蛋白抗体 杂交瘤(B类);C3110D2E11

RL1(大鼠肺成纤维样细胞) 5×106cells/瓶×2 JAR(胚绒毛癌细胞) 大鼠糖皮质类固醇受体(GR)ELISA试剂盒 TrxR  大鼠硫氧还蛋白还原酶 96T

MAGEG1： 黑色素瘤相关抗原G1/肝癌相关蛋白4抗体 人黑色素瘤细胞;A875

IKK Alpha + IKK beta： KB抑制蛋白激酶α/β抗体 人恶性多发性畸胎瘤细胞;ERA-2

QGY-7701(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人细胞裂解液 (阳性对照) 人白介素受体相关激酶(IRAK)ELISA 试剂盒 NGX6 (nasopharyngeal carcinoma/NPC associated gene 6) 鼻咽癌细胞相关基因6(多肽) 0.5mg

Interferon alpha 11： 干扰素α11抗体 人角质细胞HHFK

XCL1 Protein Human 重组人 XCL1 蛋白 (His 标签) 人白介素9(IL-9)ELISA 试剂盒 NIT2 (nitrilase family, member 2) NIT2蛋白抗原 0.5mg

IFNA10： 干扰素α10抗体 Spike Others MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 Protein (aa 1-725) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

MCF-7人乳腺癌细胞CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠成纤维生长因子受体底物2(FRS2)ELISA试剂盒 FA(Human Folic acid)  人 96T

RBMY1A1： RNA结合蛋白片段Y染色体家族蛋白1抗体 GZMB Others Human 人 Granzyme B / GZMB 人细胞裂解液 (阳性对照)

人滑膜细胞总RNAHS NA 大鼠成肌分化蛋白(MyoD)ELISA试剂盒 ET(Human endotoxin)  人内毒素 96T

RNA polymerase III： RNA聚合酶III抗体 非洲绿猴肾细胞;VERO

人胚肺二倍体细胞;HEL-1 人胃粘膜上皮细胞培养基 100mL 大鼠沉默调节蛋白3(SI3)ELISA试剂盒 PPAR- Gamma(Human Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma)  人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ 96T