在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。

　　由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。ELISA试剂盒可用于测定抗原，也可用于测定抗体。

　　完整的elisa检测试剂盒包含以下各组分：

　　（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；

　　（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

　　（3）酶的底物；

　　（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定

　　中）；

　　（5）结合物及标本的稀释液；

　　（6）洗涤液；

　　（7）酶反应终止液。

　　注意事项：

　　1、当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。

　　2、洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。

　　3、一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，使用排枪加样。

　　4、请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。

　　5、如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数。

　　6、在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。

　　7、底物请避光保存。

　　8、不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。