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操作兔ELISA试剂盒别大意!这些细节一定要盯紧
  • 发布日期:2026-01-06      浏览次数:16
    • 兔ELISA试剂盒是一种用于检测兔子样本中特定蛋白质、抗体或激素等生物分子的工具。这种试剂盒基于酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,通过抗原与抗体的特异性结合反应来实现对目标物质的定量检测。

      操作兔ELISA试剂盒时需要注意多个细节,以确保实验结果的准确性和可靠性。以下是几个关键方面的注意事项:

      实验流程关键点

      1‌标准曲线‌:每次测定需同步制作标准曲线并设复孔,样本OD值过高时需稀释后计算(×n×5)‌。

      2、洗板:使用多通道洗板器时,注意洗液加满每孔,避免交叉污染。手工洗板时,洗液不应在孔间流动,chedi拍干后继续下一步操作。

      3、显色与终止:显色液需避光处理,加显色液时要控制好量,显色时间应严格按说明书执行。终止液加入时要避免产生气泡,确保反应终止均匀。

      加样操作规范

      1‌移液器校准‌:使用前需校准移液器,确保误差≤2%,加样时保持枪身垂直,动作平稳匀速‌。

      2‌加样时间控制‌:单次加样不超过5分钟,样本量大时建议使用排枪‌。

      3‌避免交叉污染‌:枪头需“一头一换",封板膜只能一次性使用

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      实验条件控制

      正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以确保实验结果的准确性。

      若本底较高,说明可能存在非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭剂来减少非特异性结合。

      试剂准备与平衡

      1‌温度平衡‌:试剂盒从冷藏取出后需在室温(18-25℃)平衡15-30分钟,避免直接水浴加热。

      2‌洗涤液处理‌:浓洗涤液若出现结晶,可水浴加热助溶,但需wanquan溶解后再稀释使用‌

      ‌试剂保存‌:未使用的酶标板条需密封保存,底物需避光存放‌。

      样品处理

      1样品的收集、处理及保存方法需严格遵循指导,例如血清样品应在收集血液后,1000×g离心10分钟,将血清和红细胞迅速小心地分离。

      2对于不同类型的样本,如血清、血浆、细胞培养上清液等,应采取相应的处理措施

      安全与数据管理

      ‌废弃物处理‌:所有样本、洗涤液需按传染物规范处理‌。

      ‌结果判定‌:必须以酶标仪读数为准,不同批号试剂禁止混用。

      通过遵循上述注意事项,可以有效地提高ELISA实验的成功率,确保获得可靠的数据结果。‌

       


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