更新时间:2023-11-10
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产品名称 | 1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA Kit |
英文名称 | 1,3- diphosphoglycerate (1,3-DPG) ELISA Kit |
货号 | BH-G63213 |
试剂和器材:
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器
6. 蒸馏水,容量瓶等
试剂盒组成及试剂配制 :
1.酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事项:
1加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2.温育:
①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
4.显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基联苯胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以邻苯二胺(OPD)为底物,则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
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操作流程:
稀释——加样——温育——配液——洗涤——加酶——温育——洗涤——显色——终止——测定
1.有质量问题免费包换,合同上注明了的(质量问题包括运输不当,客户在使用过程中测不出结果,等等!)
2.全程技术指导.(包括售前的标本收集,使用过程中不明白的地方,实验结束后的数据分析,有任何疑问,我们技术都会即时给你去电)
3.提供免费代测的服务。(你只需把标本寄过来,我们为你节省时间,帮你出结果,原始数据,分析数据均可提供,一般时间是5天左右)
4.客户有任何问题,我们都是在一个工作日之内给出解决方案。售后和技术这一块都是竭诚为客户服务!
为什么实验过程中孵育、洗涤需要振荡、如何振荡。
振荡孵育使反应更充分,振荡洗涤使背景更干净。建议使用酶标96孔微孔板振荡器。
孵育过程振荡,可以加快、加强抗原抗体分子间的相互碰撞接触,使得反应过程更加*,OD值通常会比未振荡孵育的结果要高;洗涤过程振荡,可以使洗板更干净,在很大程度上能降低背景值,同时可以提高试剂盒检测的灵敏度,具体操作请参见说明书。