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猪elisa试剂盒操作与事项原理
  • 发布日期:2020-10-07      浏览次数:217
    • 猪elisa试剂盒的原理:

      猪elisa试剂盒的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既留存其免疫学活性,又留存酶的活性。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。因为酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。

      猪elisa试剂盒操作步骤:

      1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。

      2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。

      3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。

      4.混匀,置37℃反应30分钟。

      5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。

      6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。

      7.洗涤,同步骤5。

      8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。

      9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。

      猪elisa试剂盒注意事项:

      1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。

      2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

      3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。

      4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。

      5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。

      6.用于检测的样品应保持新鲜。

      7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

      8.不同批号试剂组分不得混用。

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