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Taq DNA聚合酶具有的特点
  • 发布日期:2023-05-29      浏览次数:461
    • Taq DNA多聚酶是耐热DNA聚合酶,是从水栖高温菌(Thermus aquaticus)中分离的,由分子量为109000的一条多肽链构成。dna聚合酶具有几种功能:一是聚合作用,以DNA为模板,将dNTP中的脱氧单核苷酸逐个加到3’末端。二是有3’→5’外切酶活力,能识别和消除错配的引物末端,与复制过程中校正功能有关。三是5’→3’外切酶活力,它能从5’端水解核苷酸,还能经过几个核苷酸起作用,切除错配的核苷酸。在体外实验中,Taq DNA聚合酶的出错率为10-4~10-5

      Taq DNA聚合酶具有以下特点:

      1、耐高温,在70℃下反应2小时后其残留活性在90%以上,在93℃下反应2小时后其残留活性是仍能保持60%,而在95℃下反应2小时后为原来的40%。

      2、在热变性时不会被钝化,故不必在扩增反应的每轮循环完成后再加新酶。

      3、一般扩增的PCR产物长度可达2.0 kb,且特异性也较高。

      一典型的PCR反应约需的酶量为2.5u(总反应体积为50ml时),浓度过高可引起非特异性扩增,浓度过低则合成产物量减少。


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