干扰ELISA酶联免疫吸附实验结果的因素有哪些?
发布日期:2024-08-26 浏览次数:339
ELISA酶联免疫吸附实验原理:免疫分析是一种利用特定抗体与抗原或半抗原发生的高选择性高特异性识别和结合原理,对待测抗体或者抗原进行分析测定的方法,酶联免疫吸附分析(下称ELISA)是免疫分析的一种,分三个部分组成:免疫识别,信号输出和数据处理。
影响酶联免疫吸附试验ELISA结果的因素有哪些?
主要包括检测板、包被缓冲液、捕获抗体、封闭缓冲液、靶抗原、检测抗体、酶偶联物、洗涤液、底物、信号检测的质量和完整性都会干扰正确的 ELISA 测试。一些可能干扰测试的因素如下:
1. 微孔板:孔的形状和质量、板的材料、潜在的预激活、均匀或不均匀的涂层
2.缓冲液:pH、污染
3.捕获和检测抗体:孵育时间、温度、特异性、滴度、亲和力
4.封闭缓冲液:交叉反应、浓度、污染
5.靶抗原:构象、稳定性、表位
6.酶结合物:类型、浓度、功能、交叉反应
7.清洗:污染、频率、体积、持续时间、成分
8.基板:微孔板的质量、材质
9.检测:检测相关的仪器设备:比如:分光光度计、读板机等相关因素
10. 误差:人为误差(实验步骤不规范等)