PCR扩增时加入的引物利用荧光素进行标记,使引物和荧光探针同时与模板进行特异性结合,扩增结果通过荧光信号采集系统实时采集信号并输送到计算机分析处理系统,实时输出量化结果,这样的PCR仪叫实时荧光定量PCR仪。
(1)金属板式实时定量PCR仪
可作为普通PCR仪使用
可带梯度功能
可容纳的样本量大,无需特殊耗材
温度均一性欠佳,有边缘效应,标准曲线的反应条件难以做到与样品全一致
(2)离心式实时定量PCR仪
温度均一性较好
使用的是同一个激发光源和检测器,随时检测旋转到跟前的样品,有效减少系统误差
可容纳样品量少,有的需用特殊毛细管作样品管,增加了使用成本,也不带梯度功能
(3)各孔独立控温的定量PCR仪
不同样品槽分别拥有独立的智能升降温模块,各孔独立控温,适合多指标快速检测。
SmartCyclerⅡ的软件允许一台仪器同时操作六个样品模块,既满足高速批量要求,又能灵活运用,还可实现任意梯度反应。
SmartCyclerⅡ上样不如传统方法方便,而且需要有的扁平反应管,使用成本较高。