标准曲线整体偏低

试剂过期或保存不当（如反复冻融）。

标准品未wanquan溶解或稀释错误。

终止液加入后未及时检测（超过10分钟）。

不同批次试剂混用。

检查试剂有效期，避免反复冻融。

确保标准品wanquan溶解，按说明书稀释。

终止液加入后立即检测（10分钟内）。

使用同一批次试剂。

标准曲线整体偏高

酶标仪光密度范围设置错误（如超过3.5）。

工作液浓度过高。

孵育时间过长或温度过高。

调整酶标仪光密度范围至0-3.5。

按说明书稀释工作液。

严格控制孵育时间和温度（37℃±1℃）。

无颜色/显色淡

漏加酶或显色液

酶（如HRP）被叠氮钠污染而失活

加样量不足或有气泡

显色剂加入顺序错误或量不足

标准品失效

严格遵循说明书步骤，防止漏加试剂

确保试剂不含NaN₃防腐剂

规范移液操作，排尽气泡

按A液、B液顺序足量加入显色剂

复查标准品制备和储存条件

背景值高/花板/假阳性多

洗涤不chedi

封闭不wanquan

嗜异性抗体等干扰物质存在

吸头或容器污染

孵育时间过长或温度过高

确保洗液注满孔，浸泡30-60秒，垂直冲洗

使用合适的封闭剂并保证封闭时间

选用含阻断剂的稀释缓冲液

实验全程更换吸头，避免交叉污染

严格控制孵育时间和温度的一致性

满板白（无显色）

误加终止液或漏加关键试剂（如底物）。

蒸馏水受污染。

检查操作步骤，确保未误加终止液。

使用新鲜蒸馏水或去离子水。

满板显色（高OD值）

显色时间过长或温度过高。

洗涤不chedi，残留酶结合物。

严格控制显色时间（通常10-15分钟）。

确保洗涤chedi（每次浸泡1-2分钟，拍干）。