白三烯ELISA检测试剂盒是一种基于酶联免疫吸附技术(ELISA)的高灵敏度定量检测工具，专门用于测定生物样本中白三烯(Leukotrienes,LTs)的浓度，包括LTB4、LTC4、LTD4、LTE4等关键亚型，广泛应用于炎症疾病研究、药物开发及临床诊断等领域。其核心原理是通过抗原-抗体特异性结合与酶催化显色反应，实现目标分子的精准定量。

　　白三烯ELISA检测试剂盒的操作流程：

　　1、试剂与样本准备：

　　试剂盒提前从2~8℃取出，置于室温(20~25℃)平衡15~30分钟。

　　浓缩洗涤液若有结晶，可40℃水浴助溶后再按比例(如20倍/30倍)稀释成工作液。

　　标准品按说明书逐级稀释(如0、15、30、60、120、240 pg/mL等浓度梯度);样本若需稀释(如5倍)，按相应比例用样本稀释液混匀。

　　样本(血清、血浆、上清等)避免反复冻融，且不能含有叠氮钠(NaN₃)，因其会抑制HRP活性。

　　2、加样：

　　取所需酶标板条，设空白孔(仅加稀释液或空白)、标准品孔(各浓度50μL)、待测样本孔(先加稀释液40μL + 样本10μL，或直接加100μL，依说明书)。

　　加样时将 tip 靠于孔底，避免产生气泡，轻轻混匀(勿触及孔壁)。

　　第一抗体/酶结合物孵育：

　　除空白孔外，每孔加酶标试剂(HRP标记的检测抗体，通常100μL)，封板膜封好。

　　37℃恒温箱或水浴孵育30~60分钟(具体时间见说明书)。

　　3、洗涤：

　　揭掉封膜，弃液体，甩干。每孔加满洗涤液(约300~350μL)，静置1分钟，甩干，在吸水纸上拍干。

　　重复洗涤3~5次(手工或洗板机)。

　　4、显色：

　　每孔依次加显色剂A 50μL、显色剂B 50μL，轻轻振荡混匀。

　　37℃避光显色10~15分钟(肉眼可见标准孔呈蓝色梯度)。

　　5、终止与读数：

　　每孔加终止液50μL(蓝色立转黄色)，15分钟内用酶标仪在450nm波长(有时加630nm参比)测定各孔OD值。

　　以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，代入样本OD值算出浓度，再乘以稀释倍数即为实际浓度。