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同型半ELISA检测试剂盒操作步骤
  • 发布日期:2018-11-29      浏览次数:1367
    • 同型半ELISA检测试剂盒

      操作步骤:
      1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
      2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
      3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。
      4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
      5. 每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
      6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
      7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。
      8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
      9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。

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