癌基因转化细胞基因组 DNA 转染法实验步骤：

1、 提取基因DNA(含癌基因).

2、 DNA准备:取供体DNA50～100微克,加3M NaCl或醋酸钠使最终浓度至0.3M混匀.

3、 再加2倍体积无水乙醇,3000转/分离心10分钟,去上清.

4、 加入转染缓冲液,待DNA充分融解后,再加入2.5M CaCl2,令最终浓度为125mM,用吸管轻轻吹打三次.置室温下10～30分钟,待液体透明度降低,出现微浊蓝色时,即可用于转染受体细胞.

5、 细胞:取生长状态良好、处于半汇合阶段的指数增生期细胞,在转染前24小时,更换培养液1次.

6、 转染:向每瓶中加DNA－磷酸钙沉淀物0.5～1ml/瓶,置37℃作用4～6小时.

7、 培养:弃去培养液,用15％甘油处理3分钟,无血清培养漂洗1次,加入新培养液,37℃温箱培养24小时.

8、 传代:按1:5或1:10分瓶传代,每2～3天换液1次,接近汇合时血清用量降至5％,培养2～3周.

9、 检测:逐日观察,待出现转化灶后,分离入另瓶中培养.