试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人心型脂肪酸结合蛋白（h-FABP）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的人心型脂肪酸结合蛋白（h-FABP）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

　　小鼠ELisa试剂盒的操作注意事项：

　　1、试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶*溶解后再使用。

　　2、实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

　　3、标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白；预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。

　　4、严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

　　5、所有液体组分使用前充分摇匀。