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谈谈进口ELISA试剂盒中的防腐剂
  • 发布日期:2021-08-16      浏览次数:43
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        进口ELISA试剂盒是一种敏感性高、特异性强、重复性好的ELISA试剂盒,其试剂安稳、易保留、操作简练、作用区分客观等要素,适宜于大规模筛查实验又能够用于少数标本的检查,能够做定性实验也能够做定量分析。
        试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
        进口ELISA试剂盒中常用的防腐剂有:
        1、叠氮钠是HRP的抑制剂,凡是和HRP接触的试剂,一定不能用;
        2、硫柳汞在ELISA试剂中可普遍使用,但因其有毒,较少使用;
        3、市面许多试剂盒产品,用抗生素做防腐剂较多,如庆大。
        4、如果试剂仅在实验室短期使用,其实并不需加防腐剂,常规试剂放4度冰箱,抗体、酶等加甘油分装冻存即可。
        5、防污染可添加0.02%的叠氮钠,或0.01%的硫柳汞。叠氮钠在多数情况下有用且有效,但在有些实验中却不合适,因为它能阻断细胞的电子传递链,对许多生物体都有毒性,因此不能用于活体实验;因为含有氨基而能干扰许多标记方法;不能用于辣根过氧化物酶标记的抗体。而硫柳汞不含氨基,不影响基质的稳定性。如果将抗体应用于生物活性检测、体内实验,一般不使用任何防腐剂,这些实验用的抗体应少量分装冷存,切忌反复冻融。
        6、吐温-20是作为稳定剂,可减少非特异性黏合。
        7、甘油是防止冻融过程中的固-液相变而引起蛋白变性,能有效地增强蛋白质的稳定性,-20度冻存时甘油的浓度可以在20~30%。
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