更新时间:2023-11-10
pBM28 Toposmart 克隆试剂盒保存条件:-20℃保存。引物M13F(-21)和M13R可用于菌落PCR和测序鉴定。
公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
商品属性
货号 | 产品名称 | 规格 |
P-PR1213 | pBM28 Toposmart 克隆试剂盒 | 20 次 |
保存条件:-20℃保存。
产品介绍:
利用痘苗病毒的拓扑异构酶I(Topoisomerase I)的切割再连接的特点将PCR产物定向克隆到线性化的pBM28载体中。适用于克隆由Pfu、sPfu、KOD、Xerox、Phusion和Q5 等高保真DNA聚合酶扩增的平末端PCR产物。pBM28 载体类似于公司的pENTR/D-TOPO入门载体, 具有attL1 和attL2,为gateway系统中的入门载体。引物M13F(-21)和M13R可用于菌落PCR和测序鉴定。
产品特点:
(1)连接反应仅需 5 分钟。
(2)只适合平末端 PCR 产物的快速、高效、定向克隆。
(3)载体采用了新的制备工艺,零背景,无需蓝白斑筛选。
(4)与pBM27载体相比,pBM28载体无标签序列。
(5)载体为壮观霉su抗性。
注意事项:
(1)引物要求:PCR 引物5’端不能进行磷酸化修饰,普通商业化引物即可。上游引物的5’ 端添加CACC 四个碱基(CACC 为真核表达所必需的Kozak 序列)。
(2)DNA 聚合酶:选用Pfu、sPfu、Phusion、Q5、KOD 和Xerox 等高保真DNA 聚合酶用于PCR 扩增。
(3)连接时间:5-15 分钟,一般为 15 分钟。
(4)连接温度:室温 (22℃-37℃),可使用PCR仪控温。最佳反应温度为25℃。若片段有高GC等复杂结构,可在37℃反应。
(5)产物要求:为保证PCR产物完整,建议72℃后延伸5-10分钟。连接前使用琼脂糖凝
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