更新时间:2025-09-02
乳酸脱氢酶活性(WST-8法) 微量法说明书测定的原理是通过检测LDH催化丙酮酸还原为乳酸的过程中NADH的生成量来间接测定LDH的活性。人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)elisa试剂盒Human thymic stromal lymphopoietin, TSLP Elisa Kit人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)elisa试剂盒Human Perforin/Pore-formi
乳酸脱氢酶(LDH)活性微量法说明书测定的原理是通过检测LDH催化丙酮酸还原为乳酸的过程中NADH的生成量来间接测定LDH的活性。
具体过程如下:
反应原理:在LDH的作用下,NAD+被还原生成NADH。NADH与WST-8相互作用产生颜色,从而进行比色测定(λmax=450 nm)。
反应条件:LDH将NAD还原为NADH,NADH与WST-8相互作用产生颜色。这个反应在冰上避光进行,各组分(如Assay Buffer、Lactate、NAD、WST-8、Enhancer)需在实验前从冰箱中取出并平衡至室温,整个过程需避光操作。
吸光度测量:在450 nm波长下测量吸光度,吸光度与LDH活性成正比,可以通过比色法测定LDH的活性。
实验步骤和所需设备:
实验步骤:准备工作液(1×Assay Buffer、NAD、WST-8、Enhancer和Lactate混合均匀),将工作液加入96孔板或微量玻璃比色皿中,加入待测样品,37℃恒温孵育一定时间后测量吸光度。
所需设备:酶标仪或可见分光光度计(能测450 nm处的吸光度)、恒温箱、制冰机、低温离心机、96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头、去离子水、匀浆器(如果是组织样本)。
实验注意事项:
试剂保存:各组分(如Assay Buffer、Lactate、NAD、WST-8、Enhancer)需在冰上避光保存,避免反复冻融。
操作注意事项:整个实验过程需在冰上避光进行,避免光照影响结果。
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