ELISA是酶联接免疫吸附剂测定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。
 

　　1.　试剂
 

　　(1)　包被缓冲液(PH9.60.05M碳酸盐缓冲液):NaCO31.59克　NaHCO3　2.93克　　加蒸馏水至1000ml
 

　　(2)　洗涤缓冲液(PH7.4PBS)：0.15M　KH2PO40.2克　Na2HPO4·12H2O　2.9克　NaCl8.0克KCl0.2克Tween-200.05%0.5ml加蒸馏水至1000ml
 

　　(3)　稀释液:牛血清白蛋白(BSA)0.1克　加洗涤缓冲液至100ml　或以羊血清、兔血清等血清与洗涤液配成5～10%使用。
 

　　(4)　终止液(2MH2SO4)：蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸(98%)21.7ml。
 

　　(5)　底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml　0.1M柠檬酸(19.2克/L)24.3ml　加蒸馏水50ml。
 

　　(6)　TMB(四甲基联苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml底物缓冲液(PH5.5)10ml0.75%H2O232μl
 

　　(7)　ABTS使用液:ABTS　0.5mg　底物缓冲液(PH5.5)1ml　3%H2O2　2μl
 

　　(8)　抗原、抗体和酶标记抗体。
 

　　(9)　正常人血清和阳性对照血清。
 

　　2.　器材:
 

　　(1)　聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔，ELISA检测仪，50μl及100μl加样器，塑料滴头，小毛巾，洗涤瓶。
 

　　(2)　小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。
 

　　(3)　4℃冰箱，37℃孵育箱。